Procedura operativa di sterilizzazione dell'ossido di etilene

(1) Secondo i requisiti del test, preparare la sospensione delle spore e le sezioni batteriche di Bacillus subtilis var. Subtilis var. Niger. Le fette batteriche sono sigillate in sacchetti di plastica in polietilene a doppio strato, per ogni test vengono utilizzate 2 fette per sacchetto . 20.
(2) Impostare un punto negli strati interni, medi ed esterni dello sterilizzante, per un totale di 9 punti. Metti una borsa nel mezzo di ogni punto, per un totale di 18 sacchi di fette batteriche di prova. Posizionare un'altra borsa (2 fette) di fette batteriche a temperatura ambiente come controllo positivo.
(3) Eseguire la sterilizzazione dell'ossido di etilene in condizioni di carico completo in base alla concentrazione di ossido di etilene, tempo di azione, temperatura e umidità relativa nell'armadio specificato nel manuale di istruzioni. Il carico completo dipende dallo scopo dello sterilizzatore. Dopo il trattamento, eliminare le fette batteriche, trasferirle a 5 ml di coltura di brodo di nutrienti e coltivarli in un incubatore di 37 gradi. Osservare i risultati finali dopo 7 giorni (test di cultura qualitativa).
Per i tubi di brodo di nutrienti con risultati difficili da giudicare, prendere 0,2 ml di sospensione e inoculare la piastra di agar nutrienti. Usa un bastoncino L sterile per diffondersi uniformemente e posizionare in un incubatore di 37 gradi per la coltura. Dopo 48 ore, colorare lo striscio e osservare la morfologia della colonia al microscopio o eseguire altri test per determinare se vi è crescita o se la crescita è i batteri del test. Se non si tratta dei batteri del test, il test deve essere ripetuto.
(4) Durante il test, i gruppi di controllo positivo qualitativi e quantitativi dovrebbero essere impostati contemporaneamente.
(5) Per il gruppo di controllo positivo quantitativo, posizionare lo stesso lotto di fette batteriche di prova a temperatura ambiente. Dopo che il gruppo di test di disinfezione o sterilizzazione raggiunge il tempo di azione specificato, posizionare immediatamente due pezzi delle sezioni batteriche nei tubi di prova contenenti 5,0 ml di PBS e agitare ciascuno per 80 volte. Prendi la soluzione di lavaggio e conta la cultura dei batteri vivi secondo il metodo mostrato in 2.1.1.3.
(6) Per il gruppo di controllo positivo qualitativo, posizionare le fette batteriche di prova dallo stesso lotto a temperatura ambiente. Dopo che il gruppo di test di sterilizzazione raggiunge il tempo di azione specificato, inoculare immediatamente 2 delle fette batteriche in 5,0 ml di mezzo di brodo nutrizionale, metterli in un incubatore per la coltura qualitativa e osservare se esiste una crescita batterica.
(7) Per il gruppo di controllo negativo, inoculare 2 fette di campione non contaminate dallo stesso lotto a 5,0 ml di mezzo di brodo di nutrienti e posizionare il mezzo di brodo nutriente non inoculato in un incubatore per coltura qualitativa per osservare se esiste una crescita batterica.
(8) Il test viene ripetuto 5 volte.
(9) In ciascuno dei 5 test, il conteggio batterico recuperato delle sezioni batteriche di controllo positivo dovrebbe essere compresa tra 5 × 10 CFU/fetta e 5 × 10 CFU/fetta; Il gruppo di controllo positivo qualitativo dovrebbe avere una buona crescita batterica; E il controllo negativo non dovrebbe avere una crescita batterica. Se i risultati del controllo positivi o negativi non soddisfano i requisiti di cui sopra, il test sarà non valido e ripetuto.
Regolamenti di valutazione
Nei cinque test di sterilizzazione, il gruppo di controllo positivo quantitativo in ciascun test aveva un conteggio batterico rilevato e recuperato di 5 × 10 CFU/pezzo a 5 × 10 CFU/pezzo; Il gruppo di controllo positivo qualitativo ha avuto una buona crescita batterica. Il controllo negativo non dovrebbe avere una crescita batterica. Quando tutti i pezzi batterici del test non hanno una crescita batterica, la sterilizzazione è considerata qualificata.
Precauzioni
(1) La temperatura e l'umidità relativa hanno una grande influenza sull'effetto di sterilizzazione del gas di ossido di etilene, quindi le condizioni rilevanti nel test dovrebbero essere strettamente controllate.
(2) Il liquido di ossido di etilene può dissolvere polietilene, polivinil cloruro, ecc. E il suo liquido non deve essere gocciolato su tali oggetti. L'ossido di etilene, che sia liquido o gas, può danneggiare i prodotti celluloidi, quindi durante il test dovrebbe essere prestata attenzione.
(3) L'ossido di etilene è infiammabile ed esplosivo. Le misure di prevenzione dell'incendio ed esplosione dovrebbero essere adottate nel sito operativo e non dovrebbero essere consentite fiamme aperte e scintille elettriche.
(4) L'inalazione di gas di ossido di etilene eccessivo può causare sintomi di avvelenamento come mal di testa e vomito e nei casi gravi può causare edema polmonare. L'ambiente di lavoro dovrebbe avere una buona ventilazione. Durante la giornata di lavoro di 8 ore, la concentrazione di ossido di etilene non deve superare 1,82 mg/m3 (1 ppm) e la concentrazione di esposizione durante il lavoro di 15 minuti non deve superare 9,1 mg/m3 (5,0 ppm). Se si verificano sintomi di avvelenamento, lasciare immediatamente la scena. Per casi lievi, respirare aria fresca fino a quando i sintomi scompaiono; Per i casi più gravi, inviare in ospedale per cure in tempo.